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维生素A含量测定的方法有哪些?
维生素A含量测定的方法有哪些?
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维生素A含量测定的方法有哪些?

维生素A为用1g含270万单位以上的维生素A醋酸酯结晶加精致植物油制成的油溶液。维生素A胶丸为取维生素A,加精炼食用植物油(在0℃左右脱去固体脂肪)溶解并调整浓度后制成。2005版《中国药典》二部附录(VIIJ)收载了其含量测定方法。\x0d\x0a文献报道的方法:\x0d\x0a马莉等用RP-HPLC法测定维生素A的含量。仪器:岛津LC-10AT。色谱柱:HuupersilODS(150mm×4.6mm);流动相为96%甲醇;流速:1.0ml/min;检测波长:325nm;柱温:25℃。\x0d\x0a黄双路等用盐酸溶解维生素A胶丸的胶壳后,以环己烷萃取内容物,采用紫外分光光度法测定含量,最大吸收峰波长在326~329nm之间。\x0d\x0a李枝端等用三点校正法测定维生素A的含量。维生素A醋酸酯测定波长:λ1=316nm,λ2=328nm,λ3=340nm;维生素A醇测定波长:λ1=310nm,λ2=325nm,λ3=334nm。

维生素A测定法简介
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维生素A测定法简介

目录 1 拼音 1.1 第一法 1.2 第二法 1.3 【附注】 1 拼音 wéi shēng sù A cè dìng fǎ 本法是用分光光度法测定维生素A在特定波长处的吸收度来计算其含量,以单位表 示,每单位相当于全反式维生素A醋酸酯0.344μg或全反式维生素A醇0.300μg。 由于维生素A制剂中含有稀释用油和维生素A原料药中混有其他杂质,所测得的吸收度不是维生素A独有的吸收。在以下规定的条件下,非维生素A物质的无关吸收所引入的误差可以用校正公式校正,以便得到正确结果。 校正公式系采用叁点法,除其中一点是在吸收峰波长处测得外,其他两点分别在吸收峰两侧的波长处测定,因此仪器波长若不够准确时,即会有较大误差,故在测定前,应校正仪器波长。 测定应在半暗室中尽速进行。 合成维生素A和天然鱼肝油中的维生素A是酯式维生素A。如供试品中干扰测定的杂质较少,能符合下列第一法测定的规定时,可直接用溶剂溶解供试品后测定;否则应按第二法,经皂化提取,除去干扰后测定。 1.1 第一法 取供试品适量,精密称定,加环己烷溶解并定量稀释制成每1ml中含9~15单位的溶液,照分光光度法,测定其吸收峰的波长,并在下列各波长处测定吸收度,计算各吸收度与波长328nm处吸收度的比值和波长328nm处的E1% 1cm值。 波长, nm 吸收度比值 波长, nm 吸收度比值 300    0.555   340    0.811 316    0.907   360    0.299 328    1.000 如果吸收峰波长在326~329nm之间,且所测得各波长吸收度比值不超过上表中规定的±0.02,可用下式计算含量: 每1g供试品中含有的维生素A的单位=E1% 1cm(328nm)×1900 如果吸收峰波长在326~329nm之间,但所测得的各波长吸收度比值超过表中规定值的±0.02,应按下式求出校正后的吸收度,然后再计算含量。 A(校正)=3.52(2A-A-A) 如果校正吸收度与未校正吸收度相差不超过±3.0%,则不用校正吸收度,仍以未经校正的吸收度计算含量。 如果校正吸收度与未校正吸收度相差在-15%至-3%之间,则以校正吸收度计算含量。 如果校正吸收度超过未校正吸收度的15%或+3%,或者吸收峰波长不在326~329nm之间,则供试品须按下述第二法测定。 1.2 第二法 精密称取供试品适量(约相当于维生素A总量500单位以上,重量不多于2g),置皂化瓶中,加乙醇30ml与50%(g/g)氢氧化钾溶液3ml,置水浴中煮沸回流30分钟,冷却后,自冷凝管顶端加水10ml冲洗冷凝管内部,将皂化液移至分液漏斗中(分液漏斗活塞涂以甘油淀粉润滑剂),皂化瓶用水60~100ml分数次洗涤,洗液并入分液漏斗中,用不含过氧化物的乙醚振摇提取4次,每次振摇约5分钟,第一次60ml,以后各次40ml,合并乙醚液,用水洗涤数次,每次约100ml,洗涤应缓缓旋动,避免乳化,直至水层遇酚酞指示液不再显红色,乙醚液用铺有脱脂棉与无水硫酸钠的滤器滤过,滤器用乙醚洗涤,洗液与乙醚液合并,放入250ml量瓶中,用乙醚稀释至刻度,摇匀;精密量取适量,置蒸发皿内,在水浴上低温蒸发至5ml后,置减压干燥器中,抽干,迅速加异丙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含维生素A9~15单位,照分光光度法(附录Ⅳ A),在300、310、325与334nm四个波长处测定吸收度 ,并测定吸收峰的波长。吸收峰的波长应在323~327nm之间,且300nm波长处的吸收度与325nm波长处的吸收度的比值应不超过0.73,按下式计算校正吸收度。 A(校正)=6.815A-2.555A-4.260A 每1g供试品中含有的维生素A的单位=E1% 1cm(325nm,校正)×1830 如果校正吸收度在未校正吸收度的±3%以内,则仍以未经校正的吸收度计算含量。 如果吸收峰的波长不在323~327nm之间,或300nm波长处的吸收度与325nm波长处的吸收度的比值超过0.73,则应自上述皂化后的乙醚提取液250ml中,另精密量取适量(相当于维生素A300~400单位),减压蒸去乙醚至约剩5ml,再在氮气流下吹干,立即精密加入甲醇3ml,溶解后,精密量取500μl,注入维生素D测定法第二法项下的净化用色谱柱系统,准确收集含有维生素A的流出液,在氮气流下吹干,而后照上述方法自“迅速加异丙醇溶解”起,依法操作并计算含量。 1.3 【附注】 (1)甘油淀粉润滑剂 取甘油22g,加入可溶性淀粉9g, 加热至140℃,保持30分钟并不断搅拌,放冷,即得。 (2)不含过氧化物的乙醚